Проведение данной судебной генетической экспертизы было направлено на анализ биологических образцов для установления вероятности отцовства. Основная цель заключалась в определении, было ли отцовство одного из участников процесса исключено или, напротив, подтверждено с высокой степенью вероятности. Процесс исследования включал изучение уникальных генетических маркеров, называемых STR-локусами, которые наследуются от родителей к детям. Эксперты столкнулись с необходимостью тщательной подготовки образцов и высокочувствительных лабораторных процедур, чтобы обеспечить точность и достоверность результатов. Сложность работы заключалась в выборе оптимальных методов анализа, позволяющих получить максимально информативный генетический профиль каждого участника. Применяемые методики, такие как полимеразная цепная реакция (ПЦР) и капиллярный электрофорез, требовали строгого соблюдения протоколов и использования специализированного оборудования. Эти методы позволяли не только получить ДНК из представленных образцов буккального эпителия, но и амплифицировать, а затем типировать полиморфные STR-локусы, критически важные для сравнительного анализа. Подход к исследованию был основан на принципах сравнительного анализа генотипических аллельных комбинаций, что является ключевым для оценки родственных связей. Эксперты также учитывали необходимость биологического материала матери, поскольку его наличие существенно повышает точность и достоверность результатов при установлении отцовства, позволяя более полно определить отцовские аллели у ребенка. Это обеспечивало большую уверенность в полученных данных, даже при возможности установления отцовства в отсутствие материнского материала, но с осознанием редчайших случаев ложноположительного результата.
В ходе экспертизы были применены передовые молекулярно-генетические методы, утвержденные в судебной практике. В частности, использовались "Методические указания № 98/253 «Использование индивидуализирующих систем на основе полиморфизма длины амплифицированных фрагментов (ПДАФ) ДНК в судебно-медицинской экспертизе идентификации личности и установления родства»", утвержденные Минздравом РФ от 19.01.1999 г., а также методические указания по применению молекулярно-генетической индивидуализирующей системы на основе полиморфизма нуклеотидных последовательностей митохондриальной ДНК и рекомендации ЭКЦ МВД России по применению частот встречаемости аллелей STR-локусов. Эти документы регламентировали весь процесс исследования, от выделения ДНК до интерпретации полученных генетических профилей. Для выделения ДНК использовались наборы реагентов типа «COrDIS Sprint» и специализированное термостатное оборудование. Концентрация хромосомной ДНК измерялась с помощью полимеразной цепной реакции в реальном времени, используя наборы реагентов «XY-Детект» и анализатор нуклеиновых кислот. Типирование полиморфных STR-локусов ДНК осуществлялось с помощью 20-локусной панели набора реагентов COrDIS Plus, обеспечивающего мультиплексную амплификацию 19 STR-маркеров и локуса амелогенина человека. Фракционирование продуктов ПЦР выполнялось электрофоретически с использованием системы капиллярного электрофореза, что позволяло сравнить индивидуальные генотипические комбинации аллельных вариантов. Значимым нюансом являлось строгое соответствие исследуемых значений родства российскому законодательству, регламентирующему пороги доказательности для установления отцовства и материнства, что гарантировало высокую степень надежности полученных данных.