Генетическая ДНК-экспертиза спорного отцовства в Москве №96108

Биологический материал использовали для проверки спорного отцовства в Москве. Сравнению подлежали образцы буккального эпителия — клеток внутренней поверхности щеки. Их генетические признаки требовалось сопоставить, чтобы оценить версию биологического родства и вероятность случайного сочетания наследуемых признаков.

• Буккальный эпителий — образцы на стерильных палочках с ватным наконечником для выделения ДНК.
• Материалы гражданского дела — 1 том объёмом 56 листов.
• Определение суда — формулировки задач по спорному отцовству в гражданском деле.
• Сведения об обстоятельствах — исходная фактическая рамка для генетического сопоставления.

Материалы дела описывали спор об отцовстве и задавали условия статистической оценки. Особенностью биологического материала был наследуемый характер ДНК-маркеров: эксперты анализировали 20 участков генома и сопоставляли варианты каждого участка. Сопоставление охватывало всю 20-локусную панель.

Спор об отцовстве требовал проверить, согласуются ли наследуемые признаки в представленных образцах с версией биологического родства. Генетическая экспертиза ДНК должна была оценить эту версию по совокупности STR-локусов — коротких повторяющихся участков генома. Отдельно эксперты рассчитывали, насколько вероятно случайное сочетание таких признаков у неродственных людей, чтобы ответить на поставленный судом второй вопрос.

Производство организовали по материалам гражданского дела и биологическим образцам, отобранным в экспертном учреждении в Москве. Эксперты работали в области биологии, биохимии и клинической лабораторной диагностики. Они оформили отбор буккального эпителия, зарегистрировали образцы и выстроили лабораторные этапы от выделения ДНК до статистического сравнения профилей с учётом вопросов суда и порядка расчёта.

Лабораторную работу разделили на последовательные операции. При амплификации эксперты проверяли контрольные пробы, а приборные графики использовали для чтения аллелей — вариантов исследуемых участков ДНК. Ход анализа фиксировали электрофореграммами, то есть графиками разделения фрагментов, и таблицей сравнения генетических профилей по всем выбранным маркерам перед статистическим расчётом по спору о родстве.

• Лизис образцов — выделение ДНК реагентом COrDIS Sprint в термостате ТТ-1-«ДНК-Техн.» («Гном»).
• Количественная ПЦР — измерение концентрации набором «XY-Детект» на анализаторе «АНК-32».
• Мультиплексная амплификация — одновременное копирование 20 участков набором COrDIS Plus в T100 Thermal Cycler.
• Капиллярный электрофорез — разделение фрагментов на ABI Prism 3130xl Genetic Analyzer и сопоставление STR-профилей.

Панель COrDIS Plus охватывала 19 STR-маркеров и локус амелогенина. Эксперты размножали выбранные фрагменты методом полимеразной цепной реакции, затем разделяли их в тонких капиллярах под действием электрического поля. По положительному и отрицательному контролям они проверяли ход амплификации, после чего читали приборные графики и формировали сравниваемые генетические профили для каждого представленного биологического образца.

Статистическую часть строили как сравнение двух возможных объяснений генетических признаков: предполагаемого родства и случайного сочетания у неродственных людей. Эксперты последовательно учитывали вклад каждого маркера, рассчитывали совокупный индекс и переводили его в вероятность. Для проверки лабораторных этапов они использовали контрольные препараты при амплификации и сопоставляли коэффициенты по всей панели локусов по материалам дела.