Генетическая экспертиза биологического родства по ДНК №94974

Биологические образцы буккального эпителия — клеток со слизистой оболочки рта — стали материалом спора о биологическом родстве. Суду требовалось проверить заявленную родственную связь по ДНК. Для молекулярно-генетической экспертизы человека требовалось сопоставить наследуемые признаки.

• Материалы гражданского дела — 1 том с исходными сведениями о споре.
• Определение суда — формулировки задач для проверки биологического родства.
• Буккальный эпителий — клетки слизистой оболочки рта на стерильных аппликаторах.
• Сопроводительные материалы — протокол отбора образцов и их фотофиксация.

Родственная связь проверялась по сочетаниям аллелей — вариантов участков ДНК. Наследуемый характер этих признаков определил последовательность лабораторной работы: выделение ДНК, измерение концентрации, типирование коротких повторяющихся участков и статистическое сопоставление профилей.

Спор о биологическом родстве требовал проверить, совместимы ли наследуемые признаки в представленных образцах ДНК с заявленной родственной связью. Генетическая экспертиза ДНК должна была оценить две фактические версии: исключается ли такая связь и какова статистическая вероятность случайного совпадения генетических признаков неродственных людей. Для этого эксперты сопоставляли сочетания аллелей — вариантов участков ДНК.

Эксперты работали в Москве по материалам гражданского дела; биологические образцы отобрали в помещении экспертной организации. Работу выполняли эксперты в области биологии, биохимии и клинической лабораторной диагностики. Их профиль охватывал выделение ДНК, измерение её концентрации, генотипирование и статистическое сравнение наследуемых признаков. Ход отбора каждого биологического образца оформляли протоколом и сопровождали фотофиксацией.

Лабораторную работу выстроили как последовательность операций от подготовки буккального эпителия до сопоставления генетических профилей по отдельным локусам. Эксперты использовали реагент COrDIS Sprint, анализатор нуклеиновых кислот «АНК-32», амплификатор T100 Thermal Cycler и генетический анализатор ABI Prism 3130xl. «АНК-32» измерял концентрацию, а ABI Prism 3130xl регистрировал разделённые фрагменты. Последовательность включала 4 операции:

1. Выделение ДНК — лизис клеток буккального эпителия реагентом COrDIS Sprint.
2. Концентрация ДНК — измерение методом полимеразной цепной реакции в реальном времени.
3. Амплификация — одновременное копирование 20 участков ДНК набором COrDIS Plus.
4. Капиллярный электрофорез — разделение продуктов реакции на анализаторе ABI Prism 3130xl.

Эксперты типировали 19 STR-маркеров — коротких повторяющихся участков ДНК — и локус амелогенина. Амплификацию проверяли с помощью положительного и отрицательного контрольных препаратов. Профили сопоставляли по наследуемым вариантам каждого локуса, затем рассчитывали индекс родства и вероятность заявленной связи относительно версии о случайном совпадении. Расчётные операции выполняли отдельно для каждой проверяемой родственной версии.

Типирование проводили по Методическим указаниям № 98/253 «Использование индивидуализирующих систем на основе полиморфизма длины амплифицированных фрагментов (ПДАФ) ДНК в судебно-медицинской экспертизе идентификации личности и установления родства». Этот источник задавал порядок применения STR-систем при проверке заявленного биологического родства по буккальным образцам человека. Статистическую оценку эксперты строили на частотах встречаемости аллелей и сопоставлении альтернативных родственных версий.