ДНК-экспертиза биологического отцовства в Москве №136047

Биологические образцы буккального эпителия, то есть клеток с внутренней стороны щеки, представили для разрешения спора об отцовстве. Экспертам предстояло сопоставить наследуемые участки ДНК и оценить вероятность случайного совпадения генетических признаков.

• Буккальный эпителий — образцы для выделения хромосомной ДНК.
• Материалы гражданского дела — 1 том с обстоятельствами спора об отцовстве.
• Судебное определение — вопросы о биологическом родстве и вероятностной оценке совпадений.
• Сопроводительные материалы — протокол отбора и изображения биологических образцов.

Материалы дела содержали процессуальную постановку задач и сведения, необходимые для выбора схемы генетического анализа. Наследуемые варианты ДНК распределяются попарно, поэтому ход работы определяло сравнение аллелей — вариантов одного участка ДНК — по 20 генетическим локусам.

Спор об отцовстве требовал проверить биологическое родство по образцам буккального эпителия. Эксперты сопоставляли наследуемые варианты ДНК и рассчитывали вероятность того, что совпадение генетических признаков могло возникнуть у неродственных людей. Для решения этих задач эксперты провели генетическую экспертизу для установления отцовства. Расчёт строили по частотам вариантов исследуемых участков ДНК во всей панели маркеров.

Форма производства — судебная генетическая экспертиза. Эксперты работали в Москве по материалам гражданского дела и представленным биологическим образцам. Их профили охватывали биологическую и биохимическую экспертизу, клиническую лабораторную диагностику, судебно-медицинскую экспертизу вещественных доказательств и лабораторную генетику. В лаборатории они подготовили буккальный эпителий к молекулярно-генетическому анализу и контролировали последовательность реакций перед амплификацией маркеров.

Из буккального эпителия эксперты выделили ДНК реагентом COrDIS Sprint. Концентрацию измерили методом полимеразной цепной реакции в реальном времени на системе CFX Connect с флуоресцентной детекцией. Затем эксперты выполнили мультиплексную амплификацию: одновременно увеличили число копий 19 STR-маркеров и локуса амелогенина. Для этой стадии использовали набор COrDIS Plus и амплификатор T100 Thermal Cycler.

• Капиллярный электрофорез — разделение продуктов реакции на анализаторе ABI Prism 3130xl Genetic Analyzer.
• STR-типирование — построение генетических профилей по коротким повторяющимся участкам ДНК.
• Сравнительный анализ — сопоставление аллелей по каждому исследованному генетическому локусу.
• Вероятностный расчёт — оценка случайного совпадения признаков у неродственных людей.

Типирование проводили по 20-локусной панели с положительным и отрицательным контролями реакции. Положительный контроль содержал ДНК с заранее известными признаками, а отрицательный — реагент без ДНК; оба служили для проверки хода амплификации. Эксперты фиксировали разделённые фрагменты в виде электрофореграмм, сопоставляли профили по локусам и готовили данные для статистического расчёта при проверке родства.

При споре об отцовстве эксперты проверяли наследование каждого аллеля, то есть варианта конкретного участка ДНК. Частоты аллелей STR-локусов использовали для расчёта вероятности случайного совпадения признаков. Сравнение охватывало 19 коротких повторяющихся участков и локус амелогенина. Такая схема связывала лабораторные данные с каждым вопросом судебной генетической экспертизы и последующим вероятностным сопоставлением профилей.