Основной целью данной судебной генетической экспертизы было установление биологического отцовства предполагаемого отца по отношению к двум предполагаемым детям, а также количественная оценка вероятности такого родства. Для достижения этой цели был задействован комплексный молекулярно-генетический анализ, включающий изучение коротких тандемных повторов (STR-локусов) в образцах ДНК всех вовлеченных лиц. Экспертами производилась тщательная экстракция ДНК из образцов буккального эпителия, после чего выполнялось точное измерение концентрации ДНК методом количественной полимеразной цепной реакции (кПЦР). Следующим этапом стала мультиплексная амплификация 20 STR-локусов, включая локус амелогенина для определения половой принадлежности, с использованием современных реактивных наборов. Эта методология позволила сформировать уникальные индивидуальные генетические профили, которые были критически важны для последующего сравнительного анализа. Также проводилось изучение возможности установления отцовства при отсутствии полной триады образцов, что является важным аспектом при определении возможности дальнейшего исследования.
Проведение экспертизы требовало строгого соблюдения Методических указаний № 98/253 "Использование индивидуализирующих систем на основе полиморфизма длины амплифицированных фрагментов (ПДАФ) ДНК в судебно-медицинской экспертизе идентификации личности и установления родства", а также положений Приказа Минздравсоцразвития РФ от 12.05.2010 № 346н, регламентирующих уровень доказательности при неисключении отцовства или материнства. Значительным нюансом в таких исследованиях является значение полноценного состава участников, когда максимальную достоверность результатов обеспечивает наличие биологической матери, что повышает статистическую мощность выводов, особенно при установлении более отдаленных степеней родства. Специалисты-генетики также учитывали особенности наследования генетических маркеров, различая аутосомные локусы для прямого родства и маркеры Y-хромосомы или митохондриальной ДНК для родства по отцовской или материнской линии соответственно. Использовались специализированные оборудования, такие как термостаты, центрифуги, системы ПЦР реального времени и ДНК-амплификаторы, что гарантировало высокую точность и надежность полученных данных.
