Генетическая экспертиза ДНК для установления отцовства №156088

Биологические образцы буккального эпителия, то есть клеток с внутренней стороны щеки, требовалось сопоставить при споре об отцовстве. Для судебной генетики такие образцы служат источником ДНК. Особенность объекта определила лабораторную последовательность работы: выделение ДНК, измерение её концентрации, копирование выбранных участков и разделение полученных фрагментов.

• Буккальный эпителий — материал для проверки спорной линии биологического родства.
• Сравнительные образцы буккального эпителия — материал для сопоставления наследуемых признаков.
• Копия судебного определения — 2 листа с вопросами об отцовстве.
• Гражданское дело — 1 том документов об обстоятельствах спора.

Материалы дела задавали проверяемую версию родства и круг поставленных вопросов. Эксперты исследовали их вместе с образцами, отобранными в лаборатории в Москве для молекулярно-генетического анализа.

Спор касался биологического отцовства по отношению к каждому проверяемому родству. Судебная генетическая экспертиза ДНК должна была проверить, исключается ли такая связь по наследуемым признакам. Если версия родства подлежала вероятностной оценке, требовалось рассчитать вероятность случайного совпадения индивидуальных генетических признаков у неродственных людей. Для этого эксперты сопоставляли профили по единой панели участков ДНК.

Экспертиза имела единоличную форму производства. Эксперты с подготовкой в биологии, биохимии, лабораторной генетике и судебно-медицинской экспертизе вещественных доказательств работали по материалам гражданского дела. В лаборатории в Москве они отобрали биологический материал, подготовили образцы и провели инструментальные операции. Такой формат отвечал предмету спора об отцовстве и последовательности молекулярно-генетического анализа биоматериала.

Образцы буккального эпителия последовательно подготовили к молекулярно-генетическому анализу. Эксперты выделили ДНК реагентом COrDIS Sprint, затем измерили её концентрацию методом полимеразной цепной реакции в реальном времени на системе CFX Connect. После этого они скопировали 20 выбранных участков набором COrDIS Plus на амплификаторе T100 Thermal Cycler. Полученные фрагменты разделили капиллярным электрофорезом на анализаторе ABI Prism 3130xl.

• Выделение ДНК — подготовка клеточного материала к анализу реагентом COrDIS Sprint.
• ПЦР в реальном времени — измерение концентрации ДНК по флуоресцентному сигналу.
• Мультиплексная амплификация — одновременное копирование 19 STR-маркеров и локуса амелогенина.
• Капиллярный электрофорез — разделение фрагментов ДНК для построения сравниваемых профилей.

Генетические профили сопоставляли по STR-локусам — коротким повторяющимся участкам ДНК, которые наследуются в разных вариантах. Сравнение проводили отдельно для каждой проверяемой связи, затем рассчитывали комбинированный индекс отцовства и байесову вероятность. Типирование выполняли по Методическим указаниям № 98/253 «Использование индивидуализирующих систем на основе полиморфизма длины амплифицированных фрагментов (ПДАФ) ДНК в судебно-медицинской экспертизе идентификации личности и установления родства».