Спор об отцовстве требовал проверить, соответствует ли предполагаемое биологическое родство генетическим признакам в представленных образцах. Генетическая экспертиза для установления отцовства решала эту задачу через сравнение ДНК-профилей. Эксперты оценивали совместимость наследуемых вариантов STR-локусов — коротких повторяющихся участков ДНК. Для каждого маркера эксперты отдельно сопоставляли варианты, передаваемые между биологическими родственниками по заявленной линии.
Эксперты по биологии, биохимии и лабораторной диагностике работали с материалами гражданского дела и образцами буккального эпителия. Отбор материала проходил в лабораторных условиях. Затем эксперты разбили работу на этапы: подготовку проб, измерение количества ДНК, амплификацию выбранных участков и электрофоретическое сравнение профилей. На каждой стадии эксперты использовали приборы и реагенты, указанные в исследовательской части.
- Выделение ДНК — быстрый лизис буккального эпителия реагентом COrDIS Sprint.
- Количественная оценка — ПЦР в реальном времени с набором «XY-Детект» и анализатором «АНК-32».
- Амплификация локусов — копирование выбранных участков набором COrDIS Plus в приборе T100 Thermal Cycler.
- Капиллярный электрофорез — разделение продуктов ПЦР на ABI Prism 3130xl Genetic Analyzer.
После лизиса эксперты центрифугировали пробы на MiniSpin и поддерживали заданный температурный режим в термостате ТТ-1-«ДНК-Техн.». Концентрацию хромосомной ДНК измеряли отдельно для каждого образца. Для амплификации использовали 20-локусную панель, включавшую 19 STR-маркеров и дополнительный генетический локус. Эксперты одновременно ставили положительный и отрицательный контроли реакции. Контроль с известными признаками проверял воспроизводимость типирования, а проба без ДНК — чистоту постановки.
После электрофоретического разделения эксперты сопоставляли аллели, то есть варианты маркеров, по каждому локусу и рассчитывали статистические показатели предполагаемого родства. Типирование проводили по Методическим указаниям № 98/253 «Использование индивидуализирующих систем на основе полиморфизма длины амплифицированных фрагментов (ПДАФ) ДНК в судебно-медицинской экспертизе идентификации личности и установления родства». Источник задавал порядок применения маркерной системы при проверке отцовства и оформлении сравнительных расчётов.